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一、细胞基本属性
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细胞名称
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LNCaP clone FGC (人前列腺癌细胞)
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细胞别称
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LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC；人前列腺癌细胞
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种属来源
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人
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年龄性别
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男；50岁
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组织来源
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前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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上皮细胞样
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细胞代数
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10代以内
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背景介绍
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人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24-48小时，以使细胞再贴壁。此后，可以换上新鲜培养液。如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。
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STR位点
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Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 10,11; D13S317: 10,12; D16S539: 11; D5S818: 11,12; D7S820: 9.1,10.3; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 16,18
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特别注意
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（1）这株细胞并不形成一致的单层，而是形成集落。传代时如胰酶消化后细胞形成聚团，可以用滴管反复吹吸打碎。 （2）该细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。生长很慢。传代后 48 小时内不应扰动。需使用 Corning 的 cellbind 细胞培养瓶，货号是 3289；或者使用多聚赖氨酸 包被过的培养皿。 （3）在细胞运输途中，多数细胞会从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养 24-48 小时，以使细胞再贴壁。此后可以换上新鲜培养液。
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生物安全等级
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1
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细胞规格
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1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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支原体检测
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无
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保藏机构
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ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211； 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
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培养基
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1640+10%FBS+PS+1%谷氨酰胺+1%丙酮酸钠
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培养条件
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气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
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冻存条件
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无血清冻存液，液氮储存
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倍增时间
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~32-36 hours
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致瘤性
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Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice.
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受体表达情况
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androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive
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基因表达情况
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human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen
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细胞货期
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2周左右
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运输方式
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复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
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供应限制
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仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
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特别说明
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以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
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二、细胞培养操作
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收货方式
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T25瓶
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冻存管
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收货处理
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观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态
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收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
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传代密度
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细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养
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第二天换液并检查细胞密度
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传代比例
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首次传代建议1：2传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
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一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
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传代方法
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a、收集细胞培养上清：抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清，细胞重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
b、剩下贴壁的细胞，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。
c、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -2min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
d、按3mL/瓶补加培养基，轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
e、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养中。
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将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
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注意事项
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1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。
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1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
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到货须知
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1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
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备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
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三、细胞冻存操作
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冻存液配方
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无血清冻存液，液氮储存
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细胞密度
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待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
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冻存方法
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a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心5 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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注意事项
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冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
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四、售后服务
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重发标准
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1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发；
3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发；
4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发；
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发；
6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发；
7.视具体情况而定。
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不予重发
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1.客户操作造成细胞污染，不重发；
2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发；
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发；
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发；
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发；
7.视具体情况而定。
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