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一、细胞基本属性
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细胞名称
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SVG P12人星形胶质细胞
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细胞别称
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SVGp12; SVG(P12); 人星形胶质细胞
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种属来源
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人
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性别年龄
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男性; 8-12FW
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组织来源
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脑
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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成纤维细胞样
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STR位点
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Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11,12;D2S1338:19,21,22,24;D3S1358:15,16,17;D5S818:11,12,14;D7S820:10,12,13;D8S1179:12,13,14;D13S317:8,13,14;D16S539:10,11,12;D18S51:14,15,16,18;D19S433:13,14.2,15;D21S11:29,30;FGA:22,24,25;Penta
D:7,11,12,13;Penta E:11,12,14,18;TH01:6,7,9.3;TPOX:8,10,11;vWA:15,16,18,19
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STR鉴定
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细胞代数
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10代以内
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细胞规格
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1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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保藏机构
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AddexBio; T0005008/4960,ATCC; CRL-8621,BCRC; 60371,IZSLER; BS CL 200
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支原体检测
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无
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培养基
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MEM+10%FBS+1%PS
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培养条件
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气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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细胞货期
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现货,1周左右
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运输方式
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复苏发货(T25瓶免运输费用)/冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
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供应限制
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仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
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特别说明
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以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
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二、细胞培养操作
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收货方式
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T25瓶
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冻存管
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收货处理
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观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态
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收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
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传代密度
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细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
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第二天换液并检查细胞密度
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传代比例
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首次传代建议1:2传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
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一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
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传代方法
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方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
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注意事项
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1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。
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1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存;
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
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到货须知
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1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
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备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。
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三、细胞冻存操作
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冻存液配方
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无血清冻存液,液氮储存
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细胞密度
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待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
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冻存方法
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a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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注意事项
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冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
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四、售后服务
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重发标准
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1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
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不予重发
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1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。
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